Fura-8™, AM
產(chǎn)品概述
分子量 951.90 | 解離常數(shù)（Kd， nM） 260 | 激發(fā)（納米） 354 | 發(fā)射（納米） 524 |
盡管Fura-2已成為shou選的激發(fā)比鈣指示劑，但它具有一定的局限性（例如，靈敏度低于單波長(zhǎng)鈣指示劑，如Fluo-8®和Cal-520®）。為了解決這些問(wèn)題，亞洲空運(yùn)中心Bioquest投入了大量精力開(kāi)發(fā)Fura™ 8，這是一種高親和力比例鈣指示劑，具有更高的靈敏度和更高的信噪比。Fura 8的熒光發(fā)射紅移到更長(zhǎng)的可見(jiàn)光波長(zhǎng)，便于通過(guò)普通濾光片組檢測(cè)Fura™™ 8。Fura™ 8，AM是膜通透性的，在355nm和415nm處激發(fā)，在530nm處發(fā)射。
熒光顯微鏡
興奮 呋喃 2 過(guò)濾器套件
排放 呋喃 2 過(guò)濾器套件
推薦板 黑色墻壁/透明底部
熒光酶標(biāo)儀
興奮 355, 415
排放 530
近路 475
推薦板 黑色墻壁/透明底部
儀器規(guī)格 底部讀取模式/可編程液體處理
儲(chǔ)備溶液的制備
除非另有說(shuō)明，否則所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
呋喃-8™ AM 儲(chǔ)備液
在高質(zhì)量無(wú)水DMSO中制備2至5 mM的Fura-8™ AM儲(chǔ)備溶液。
實(shí)驗(yàn)方案樣本
以下是我們推薦的將AM酯加載到活細(xì)胞中的方案。此協(xié)議僅提供指南，應(yīng)根據(jù)您的特定需求進(jìn)行修改。在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中制備細(xì)胞過(guò)夜。
第二天，將1X Fura-8™ AM工作溶液添加到細(xì)胞板中。
注意如果您的化合物干擾血清，請(qǐng)?jiān)谏蠘尤玖现坝眯迈r的 HHBS 緩沖液替換生長(zhǎng)培養(yǎng)基。
將裝載染料的板在37°C的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育30至60分鐘。
注意孵育染料超過(guò) 1 小時(shí)可以改善某些細(xì)胞系的信號(hào)強(qiáng)度。
用您選擇的HHBS或緩沖液（含有陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抑制劑，如1 mM丙磺舒，如果適用）替換染料工作溶液，以去除任何多余的探針。
根據(jù)需要添加興奮ji，并使用配備Fura 2濾光片組的熒光顯微鏡或包含可編程液體處理系統(tǒng)（如FlexStation）的熒光板讀數(shù)器在Ex/Em下同時(shí)測(cè)量熒光1= 355/530 nm 截止值 475 nm 和防爆/電磁2= 415/530 nm 截止值 475 nm。
產(chǎn)品詳情
名稱(chēng) Fura-8™, AM
編號(hào) AAT-21055
品牌 aatbio
