swant 7697說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品名稱： 鈣網(wǎng)膜蛋白兔多抗 CR 7697

      英文名稱 ： Rabbit anti-calretinin

貨號(hào) ： 7697

批號(hào)： 1893-0114

外觀： 凍干粉

      溶解：每管用200 µl雙蒸水溶解

規(guī)格：200UL

產(chǎn)品描述

兔抗calretinin抗血清是用N末端含有6-his標(biāo)記的重組人calretinin蛋白免疫家兔制備的。

該抗體為兔抗calretinin多克隆抗體[1]，與鈣結(jié)合蛋白D-28k和鈣調(diào)素[2]都屬于EF-手性家族的鈣結(jié)合蛋白。7697鈣網(wǎng)膜蛋白特異表達(dá)于包括人、猴子、大鼠、小鼠、豚鼠，雞和魚(yú)的組織中（圖1）與鈣結(jié)合蛋白D-28k或其他已知的鈣結(jié)合蛋白不產(chǎn)生交叉反應(yīng)，此特異性取決于改抗原在腦組織中的分布位置。

抗體特異性及效價(jià)：

1、生物素-親和素標(biāo)記免疫組化檢測(cè)4%多聚甲醛（或10%福爾馬林緩沖液）固定的腦組織冷凍/石蠟切片；

2、免疫酶標(biāo)記/免疫印跡驗(yàn)證；

反應(yīng)種屬：

 WB：小鼠、大鼠、豚鼠、兔子、斑馬魚(yú)、食蟹猴、和雞。

 IHC：人，大鼠，小鼠

 經(jīng)測(cè)試 應(yīng)用：

 WB，IHC-P/Fc,，ELISA

 WB： 免疫印跡； IHC ：免疫組織化學(xué)； ELISA：酶聯(lián)免疫。

稀釋比例

免疫組化（IHC）： 1：2'000 - 1：5'000，4%多聚甲醛/福爾馬林固定組織的冰凍或石蠟切片。

免疫印跡（WB）： 1：1'000 - 1：2'000

本說(shuō)明書(shū)IHC及WB采用的是生物素標(biāo)記法，建議根據(jù)實(shí)驗(yàn)方法及內(nèi)容選擇合適的抗體稀釋比例。

儲(chǔ)存：

      解凍后分裝（如每管1ul或5ul等）保存于- 80°C冰箱。短期保存-20°C。近期頻繁使用保存于 4°C(增加

      0.01% 疊氮鈉)。 避免反復(fù)凍融。建議分裝小份儲(chǔ)存。

應(yīng)用

Calretinin可能屬于“觸發(fā)”鈣結(jié)合蛋白的一類(lèi)。它主要出現(xiàn)在神經(jīng)細(xì)胞亞群中，是間皮瘤的良好標(biāo)志物[3,4]。

免疫印跡（WB）

圖1：不同種屬全腦組織蛋白抽提液用于SDS-PAGE Western blot檢測(cè)，結(jié)果表明所有種屬均可特異性檢測(cè)到分子量為29-30k Da的條帶。

Calretinin基因敲除小鼠的免疫組織化學(xué)染色

Calretinin高表達(dá)于正常小鼠腦組織神經(jīng)元（圖2a），calretinin基因敲除小鼠腦組織區(qū)域未見(jiàn)陽(yáng)性表達(dá)（圖2b）

參考文獻(xiàn)

1. Schwaller B., Buchwald P., Blümcke I., Celio M.R. and Hunziker W. (1994) Characterization of a polyclonal antiserum against the purified human recombinant calcium-binding protein calretinin. Cell Calcium 14: 639-648.
2. Schiffmann S.N. et al (1999) Impaired motor coordination and Purkinje cell  excitability in mice lacking calretinin. PNAS, 96: 5257-5262.
3. Gotzos V., Vogt P. and M.R. Celio (1995) Calretinin is a selective marker for malignant pleural mesotheliomas of the epithelial type. Pathol. Res. Pract. 192:137- 147.
4. Doglioni, C. et al. (1996) Calretinin: a novel immunocytochemical marker for mesothelioma. Am. J. Surg. Pathol. 20:1037-1046.