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PhyNexus 蛋白質G PhyTip柱說明書

 更新時間:2019-12-06 點擊量:1809

美國phynexus公司是美國的分子生物學試劑耗材供應商,上海起發(fā)實驗試劑有限公司為您帶來phynexus公司的產品和服務

PhyNexus 蛋白質G PhyTip柱說明書

Protein G PhyTip Columns

蛋白質G PhyTip柱

蛋白質G PhyTip柱顯示功能性抗體(IgG)的高結合親和力和高選擇性親和純化。蛋白G柱顯示出對不同同種型和IgG種類的高選擇性,并獲得高度濃縮的純化蛋白

  • 高結合親和力
  • 對不同物種的高選擇性和抗體的同種型
  • IgG回收率為70-90%

使用我們專有的雙流式色譜法  提供的蛋白G提示可  提供完整的抗體結合和高終濃度。PhyTip色譜柱兼容大多數(shù)8,12和96通道自動化液體處理機器人,包括  Agilent Technologies,  Beckman Coulter,  Dynamic Devices,  Perkin Elmer,  Hamilton和  Tecan。

含有蛋白G的PhyTip色譜柱

含有蛋白G的PhyTip色譜柱已經(jīng)過優(yōu)化,可用于特定的PhyNexus試劑和儀器流速/體積,如下所示。使用PhyTip ME 1000和ME 200純化系統(tǒng)收集該信息

所有帶有蛋白G的PhyTip色譜柱都配有推薦的PhyTip緩沖液,包括:捕獲緩沖液 - 適用于需要添加額外緩沖液以補充樣品體積并確保正確捕獲pH值的情況。洗滌緩沖液I - 磷酸鹽緩沖溶液pH 7.4洗滌緩沖液II - 鹽水溶液。注意:沒有緩沖能力以確保有效洗脫富集緩沖液 - 用于終洗脫步驟 - 磷酸鹽緩沖溶液pH 2.5中和緩沖液。 - Tris緩沖溶液pH 9.0

注意:富集緩沖液以4 mL pH 2.5磷酸鹽緩沖溶液的形式提供,如果要純化的蛋白質需要較少的酸性洗脫條件,例如pH 2.8,則可以如下更改富集緩沖液的pH值:取1 mL標準富集緩沖液(pH值) 2.5)加入30μL1MTris Buffer標準中和緩沖液,得到1 mL pH 2.8洗脫緩沖液(實際pH值可能因體積精度而異)對于pH 3.0濃縮緩沖液,取1 mL標準富集緩沖液(pH 2.5) )加入40μL1MTris Buffer標準中和緩沖液,得到1 mL pH 3.0洗脫緩沖液(實際pH值可能因體積精度而異)

對于中和步驟,添加25%v / v的洗脫體積,例如,如果洗脫體積為20μL,則添加5μL的1M Tris中和緩沖液

含有蛋白G樹脂的200多個PhyTip色譜柱:

對于含有1mg BSA的5μgIgG2a(抗FITC MAb。)的200μL樣品,使用下面顯示的條件處理,在終樣品體積中回收大于40%的原始IgG質量。此外,通過用考馬斯檢測的SDS-PAGE測定,回收的IgG純度超過95%。

捕獲:通過樹脂床以250μL/分鐘的流速通過樹脂床捕獲200μL樣品。

純化:200μLPhyNexusProtein G洗滌緩沖液I,以500μL/ min的流速通過樹脂床兩個循環(huán),然后用洗滌緩沖液II進行第二次洗滌,在樹脂床上通過兩個循環(huán)流動速率為500μL/ min。

富集:用10μLPhyNexusProtein G Enrichment Buffer將蛋白質洗脫到溶液中,以500μL/ min的流速通過樹脂床5個循環(huán)。用3μLPhyNexus蛋白G中和緩沖液中和。

出廠時含有的蛋白G富集緩沖液含有:111mM NaH2PO4,140mM NaCl,14.8mM H3PO4,pH3.0

含有蛋白G樹脂的1000多種PhyTip色譜柱:

對于含有5μgBSA的10μgIgG2a(抗FITC MAb。)的500μL樣品,使用下面顯示的條件處理,在終樣品體積中回收大于40%的原始IgG質量。此外,通過用考馬斯檢測的SDS-PAGE測定,回收的IgG純度超過95%。

捕獲:通過樹脂床以250μL/分鐘的流速通過四個循環(huán)捕獲500μL樣品。

純化:1000μLPhyNexusProtein G洗滌緩沖液I,以500μL/ min的流速通過樹脂床兩個循環(huán),然后用洗滌緩沖液II進行第二次洗滌,以500的流速通過樹脂床兩個循環(huán)。 μL/分鐘。

富集:用15mL PhyNexus Protein G Enrichment Buffer將蛋白質洗脫到溶液中,以500μL/ min的流速通過樹脂床5個循環(huán)。用5μLPhyNexus蛋白G中和緩沖液中和。

PhyTip色譜柱是PhyNexus*的捕獲,純化和富集TM工具,專為微量蛋白質樣品制備而設計。PhyTip色譜柱適用于各種液體處理平臺,并含有特定的親和樹脂,可滿足特定應用要求。

 

PhyNexus建議使用含有IgG的PhyTip入門試劑盒作為標準,以驗證所有應用中PhyTip色譜柱的使用。

用于純化和富集的樣品必須清澈且無顆粒物質。在與PhyTip色譜柱一起使用之前,強烈建議離心樣品并僅使用澄清的上清液。

運輸和存儲

每包PhyTip色譜柱均按照高標準生產和質量控制,并在保留盒中運輸,以保持每個PhyTip色譜柱中特定親和樹脂的完整性。本產品在環(huán)境溫度下運輸,但收到后應存放在4到8℃的標準實驗室冰箱中。

  • 不要冷凍或儲存冷凍。
  • 不使用時,請將盒蓋關閉并密封,存放在冰箱中。
  • 在干燥環(huán)境中長時間儲存??,不要讓親和樹脂干燥。

含有蛋白G的PhyTip色譜柱在從PhyNexus發(fā)貨時儲存在甘油中。

 

Protein G PhyTip色譜柱可用于這些機器人系統(tǒng)。

機器人系統(tǒng)

Agilent Velocity 11 Bravo和V-Prep

 Beckman FX&NX 96孔

 Caliper SciClone和Zephyr 96通道(現(xiàn)為Perkin Elmer)

 動態(tài)設備Oasis&Lynx

 Hamilton STAR和Nimbus

 Perkin Elmer Janus Varispan 4或8孔

 Perkin Elmer Packard MiniTrack和Janus MDT 96頻道

 PhyNexus MEA或ME

 Tecan Freedom Evo LiHa&Tecan Te-MO

 Tecan Freedom Evo MCA 96孔 

 

樹脂

機器人系統(tǒng)

提示量

樹脂量

數(shù)量/箱

零件號

描述

蛋白質G.

Agilent Velocity 11 Bravo和V-Prep

200

20

96

PTV 92-20-02

一箱96個PhyTip柱(200μL體積)每柱20μL蛋白G親和樹脂

蛋白質G.

Beckman FX&NX 96孔

200

96

PTB 92-05-02

一箱96個PhyTip柱(200μL體積)每柱5μL蛋白G親和樹脂

蛋白質G.

Beckman FX&NX 96孔

200

20

96

PTB 92-20-02

一箱96個PhyTip柱(200μL體積)每柱20μL蛋白G親和樹脂

蛋白質G.

Caliper SciClone&Zephyr 96 channel_now Perkin Elmer

200

96

PTZ 92-05-02

一箱96個PhyTip柱(200μL體積)每柱5μL蛋白G親和樹脂

蛋白質G.

Caliper SciClone&Zephyr 96 channel_now Perkin Elmer

200

20

96

PTZ 92-20-02

一箱96個PhyTip柱(200μL體積)每柱20μL蛋白G親和樹脂

蛋白質G.

動態(tài)設備Lynx

1000

10

96

PTX 91-10-02

每盒含有10μL蛋白G親和樹脂的96個PhyTip柱(1 mL體積)

蛋白質G.

動態(tài)設備Lynx

1000

160

96

PTX 91-16-02

每盒含有160μL蛋白G親和樹脂的96個PhyTip柱(1 mL體積)

蛋白質G.

動態(tài)設備Lynx

1000

20

96

PTX 91-20-02

每盒含有20μL蛋白G親和樹脂的96個PhyTip柱(1 mL體積)

蛋白質G.

動態(tài)設備Lynx

1000

40

96

PTX 91-40-02

每盒含有40μL蛋白G親和樹脂的96個PhyTip柱(1 mL體積)

蛋白質G.

動態(tài)設備Lynx

1000

80

96

PTX 91-80-02

每盒含有80μL蛋白G親和樹脂的96個PhyTip柱(1 mL體積)

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